（1）  收集生物样本，末期血液采样与非末期血液采样技术（麻醉，血液采样等）之间存在差异。如果在实验（最终实验）结束时动物死亡，则采血与清醒动物的单次或多次采血不同。采血的情况大不相同。减少实验过程中的动物疼痛和焦虑与获得预期的实验结果一样重要。这不仅是人道主义的，而且是良好科学实践的要求。使用某些采血技术和动物引起的焦虑会引起动物压力，与压力反应相关的许多生化和生理变化会影响实验结果，例如血液中的儿茶酚胺和催乳激素。糖皮质激素的增加会影响几个代谢参数，例如葡萄糖，红细胞计数，白细胞计数和细胞体积。因此，如果不能完全消除压力，也应将其最小化。这不仅适用于动物，而且适用于具有代表性数据的出色科学实验。

　　对于非终末血液采样，请勿对血液进行过度采样。采血过多会减少总血量并产生错误的结果。总血容量减少与血红蛋白含量增加，氧转运能力增加，血压降低以及压力相关激素水平升高有关。也可能发生其他变化，例如胃粘膜坏死。

　　总血量取决于物种，性别，年龄，健康状况和营养状况。对于相同的物种，大型动物的单位体重总血容量比小型动物要少，而老年和肥胖的动物则比年轻，正常体重的动物少。减。在正常情况下，总循环血量为55-77毫升/千克体重。非终末采血可以分为单次采血和多次采血，单次采血量小于动物总血量的15％，不影响动物。但是，如果您的摄入量占总血容量的15％至20％，则可能会出现一些副作用，包括心输出量和血压下降。摄入总血量的30％至40％会导致缺血性休克，当达到40％时，约有50％的猪和大鼠可能会死亡。对于没有明显副作用的动物，单次抽血不超过动物总血容量的15％，可以在3-4周内重复采血。每24小时重复采血不得超过总血量的1％[o。在6mi /（kg，d）]的情况下，如果抽血次数或抽血量太大，就会发生贫血。对于老鼠和老鼠，通常使用尾尖果血法收集毛细血管中最多0.1 ml的血液。眶静脉穿刺通常适合无尾动物，例如仓鼠。如果尾静脉不能容纳大量的血液，该方法也可用于大鼠/小鼠。通常需要在麻醉下进行手术。只有在没有其他方法可以考虑的特殊情况下，才能在2周后使用该方法恢复眼眶静脉丛并从动物身上收集血液。此技术必须由训练有素的人员操作，并且只能由动物的一只眼睛使用。不建议在不麻醉的情况下使用摘除术收集血液。毒动学研究可使用大鼠血液采样；全身麻醉下的尾静脉，脚趾血管，心脏穿刺，颈外静脉，全身麻醉下的颈总动脉插管。

　　兔子和豚鼠可以使用耳静脉，颈静脉或大隐静脉。大型动物可以从浅静脉（隐静脉，头静脉，颈静脉）取血。

　　2、尿液收集大鼠和小鼠可以使用含有粪便和尿液的代谢笼来分离铝。在毒代动力学研究中，代谢物笼可用于半衰期长（超过几个小时）的测试化学品，半衰期短的测试化学品可通过尿道或全身麻醉下的腹壁插管入膀胱..收集尿液。狗可以使用尿液和导管插入法。

　　3、在毒物动力学研究中，可以将胆汁收集物直接插入胆总管，并且其尖端必须靠近肺门区域的分叉处。大鼠胆汁通常为0.5-1.0毫升。如果胆汁盐无法循环使用，胆汁的成分将发生变化，应在插管后立即给予测试化学药品。对于有胆囊的实验动物，例如豚鼠和兔子，有必要在胆囊底部结扎胆囊以防止其延迟胆汁引流。

　　四。为了收集粪便，大鼠和小鼠可以使用底部带有粪便分离器的代谢笼。在分析之前将表面剃光，并取出内部粪便进行分析。

　　（II）麻醉

　　在麻醉过程中，必须仔细观察动物。使用的技术设备必须能够检查多个系统，例如循环系统（心率，脉搏，血压，心电图，周围灌注，体温）和呼吸系统（呼吸率）。确定麻醉期间的麻醉深度非常重要。步。麻醉分为四个时期。 （1）镇痛期（从药物作用开始到意识丧失）。

　　（2）从意识丧失到正常呼吸结束出现兴奋期t。呼吸不规则，瞳孔散大，运动反射，眼球震颤，反射角增加。

　　（3）从正常呼吸开始到自然呼吸结束的允许时间。这个时期分为四个部分。 ①正常呼吸，瞳孔散大，大部分反射出现②骨骼肌松弛，瞳孔收缩，眼睑反射消失，角膜反射出现，呼吸稳定，无痛且麻醉是手术的理想选择③仅靠角膜反射呼吸非常困难，并且瞳孔会扩大。吸入非常稳定，瞳孔散大。

　　（4）窒息期：反射呼吸结束后中毒可防止死亡。当使用

　　ether时，在应用上述阶段时会变得更加清晰），动物的反应与上述不同，无反射，没有呼吸，接近死亡，立即解毒剂

　　手术的最佳麻醉状态是失去知觉，疼痛和放松。对于不同的物种，取决于麻醉的持续时间，短效型（30分钟），中效型（120分钟[n]），长效型（120分钟或更长，结合麻醉）。麻醉期间和麻醉后需要检查动物的体温，如果体温下降，请使用加热灯和加热垫，饮完后，动物应经历麻醉的同一阶段但是它们必须以相反的顺序进行（耐受期，兴奋期，疼痛减轻）

　　常用麻醉剂：

　　（1）短效剂：用于啮齿动物的乙醚大型动物使用硫磺的刑钠10-25 mg/kg静脉注射或腹膜内注射

　　（2）在啮齿动物中适度有效的甲苯噻嗪+氯胺酮5 + 100 mg/kg，建议对长距离动物

　　（3）长效肌肉注射2 +标记/ kg；常用戊巴比妥钠，对啮齿动物为35-50 mg/kg腹膜内注射，对大型动物静脉注射或腹膜内注射30 mg/kg，对大鼠肌肉注射乌拉坦1500地毯/ k8 （三）安乐死 euthanama它是指以一种公开接受的人道方式杀死动物的过程：在没有惊恐或焦虑痛苦的情况下和平死亡。如何死亡的最重要标准是：安乐死必须具有早期抑制作用，以证明该动物的中枢神经系统会立即失去疼痛，安乐死的选择不是实验观察者，而是被杀死动物的感觉能力。尽管操作者的主观感觉不容忽视，但斩首和流血的眩晕仍可被视为人道的安乐死。安乐死的方法适合动物的年龄。它应该无痛，不激动，不引起兴奋，应立即导致意识丧失和死亡，并且聚会应该可靠，可重复和不可逆转。建议在治疗前对狗，猫和大型动物使用镇静剂，尤其是在使用诸如断头之类的残酷方法的情况下，如果可能的话，还应尝试使用镇静剂。不要与动物放在同一房间

　　确保安乐死后动物的死亡非常重要：死亡症状包括心跳，呼吸停止，反射丧失。等等。可以通过流血或摘除心脏，大脑受损，头部断头，内脏器官切除和car体发育来确保动物死亡。 （四）病理解剖学和标本采集

　　毒理学病理学测试是毒理学测试的重要组成部分，病理学研究有助于识别有害作用和器官。毒性病理检查包括两个部分：大体解剖和组织病理检查。急性毒性研究旨在提供有关靶器官潜力和重复暴露研究剂量设计的信息，因此，应对在研究期间或研究结束时死亡的动物进行尸检。 ..病理学是亚慢性，慢性和致癌性研究的重要终点。

　　1、处死动物后30分钟内进行宏观解剖，所用的解剖方法是胸腔和腹腔内脏的联合切除方法。我们需要观察相关器官的形状和表面状况，颜色，边界和大小，纹理以及横截面。称重指定的器官并计算器官系数。

　　2、为了进行组织病理学检查，必须使用锋利的刀切开指定器官或组织的材料，并均匀地收集材料。通常将组织块固定在10倍体积的10％福尔马林中，并照常制备（组织包埋在石蜡中，HE染色的切片中）。在显微镜下观察到的病变应予以详细记录并进行病理诊断。如有必要，请其他病理学家检查可疑或有争议的发现。使用专门的染色剂，组织化学和电子显微镜技术有助于研究毒性机理。