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禽类乙肝病毒动物模型-【动物实验】

         乙型肝炎病毒(DHBV)由William等人于1980年发现。随后在各种来源的鸭子,苍鹭和野鹅中发现了该病毒。禽乙型肝炎病毒的宿主范围非常狭窄,例如,DHBV仅感染鸭和天鹅之类的鸟类,而不感染美国鸭和鸡。

  人类乙肝病毒和禽肝炎病毒有许多相似之处。两种病毒都是双螺旋DNA基因组的一部分。基因组复制取决于RNA中间体的存在。基因的编码框架之间有相当大的重叠。此外,这两种病毒在基因组和病毒结构,复制和病毒生命周期方面具有许多共性。两种病毒都是肝营养性的,并且许多肝营养性病毒的感染性都在DHBV模型中。例如,病毒基因组复制通过RNA中间体的反转录发生。诸如共价闭合环状cccDNA的形成和扩增,逆转录的详细过程以及病毒的宿主亲和力等决定因素对于研究HBV生物学特性均具有重要的参考意义。 ..

  同时,DHBV和HBV之间也存在某些差异。 DHBV基因组略小于动物肝炎病毒基因组,两者之间约有40%的核苷酸序列同源性。 DHBV基因盒中没有X基因编码,禽乙型肝炎病毒只有两种包膜蛋白,而没有三种;当DHBV由雌鸭传播给卵子时,感染通常会变成慢性感染。尽管有联系,但病毒感染通常不会引起肝损害,肝病和肝癌,被感染的鸭子终生健康;被DHBV感染的成年鸭子清除了病毒;在雌性鸭子中DHBV年轻当被传染给鸭子时,它会引起慢性感染,这种感染会在肝脏的很大一部分中发生,并且会损害并导致肝癌和肝硬化。如果成年鸭感染DHBV后仍无法清除病毒,则可能导致急性肝炎的发展。除 HepaRG(从患有慢性丙型肝炎病毒感染的肝癌患者的非肿瘤组织中分离出的人肝细胞系)外,仅原代鸭肝细胞对DHBV敏感。因此,DHBV的体外复制依赖于原代肝细胞。 DHBV能够在原代培养的鸭或成年鸭肝细胞中复制。胎儿鸭肝细胞很容易从未孵化的鸭胚胎中获得,在用胶原酶消化肝组织后可以清洗和培养。当然,该细胞系包含除肝实质以外的细胞,例如巨噬细胞和成纤维细胞。此外,可以通过灌注成年鸭肝来获得成年鸭原代肝细胞系,并且通过这种方法获得的肝细胞系相对较纯(肝细胞数达到90%以上)。可以在含有氢化可的松,胰岛素和DMSO的标准培养基中培养原代肝细胞细胞系,但是DMSO对于维持肝细胞分化和病毒敏感性特别重要。研究人员使用DHBV感染的体外模型发现了肝炎病毒复制周期中的许多详细联系。

  鸭子建立乙型肝炎病毒动物模型的优点是可以在动物中轻松测试鸭子。此外,DHBV敏感的原代肝细胞很容易从乳鸭和胚胎中分离出来。使用DHBV感染的鸭子作为模型主要用于研究病毒cccDNA作为RNA转录模板在病毒复制中的作用。尽管鸭子在DHBV感染后不会发展为肝癌,但学者们仍然将病毒基因组整合到细胞肿瘤模型的细胞染色体中,以研究病毒复制在癌症发展中的作用。

  类似于人类感染HBV的发作。鸭感染DHBV后,病程与年龄有关。通常,肝炎病毒感染可发展为急性或慢性感染。感染的结果与感染期间使用的病毒数量有关。大剂量病毒感染会增加新生鸭会持续感染的机会。感染过程中中和抗体的产生还决定了感染病毒后新生小鸭和成年小鸭疾病发展的不同过程。成年鸭迅速产生中和抗体,可以有效防止病毒在肝脏中传播。

  在正常情况下,DHBV是从母鸭垂直传播到鸭蛋,导致新生鸭的慢性感染。但是,由于免疫系统对病毒的抵抗力,动物没有表现出症状。因此,所有从雌性DHBV阳性鸭子出生的幼鸭都是DHBV阳性。在慢性感染的鸭子中,DHBV主要在肝细胞中复制。在正常情况下,病毒的复制水平很高,几乎所有的肝细胞都感染并表达病毒抗原,而外围病毒则检测到许多病毒抗原。粒子。同时,DHBV模型还将用于研究乙型肝炎病毒细胞受体,病毒变体的生长曲线以及抗病毒药物的体内和体外评估。然而,与土拨鼠不同,鸭子对抗病毒药物的毒性不敏感,并且发现鸭子的代谢系统与抗病毒药物的代谢过程相容。因此,由于病毒和宿主肝细胞之间的差异,在鸭乙型肝炎病毒模型中评估的药物的临床适用性仍然受到限制。

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