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CCK-8(WST-8)

       CCK-8是近年新开发的一种更新的水溶性四唑盐检测,原理与WST-1类似:在电子载体1-甲氧基-5-甲基酚嗪硫酸甲酯盐(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原成具有高度水溶性的橙黄色甲臜产物(Formazan)。生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比,用酶联免疫分析仪测定其光吸收值可间接反映活细胞数量,在一定细胞数量范围内甲臜形成的量与细胞数成正比。

实验方法:

       在96孔板中接种细胞悬液(100 μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养(37℃,5% CO2)。细胞经处理后。向每孔加入10 μL CCK溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。将培养板在培养箱内孵育1~4小时。用酶标仪测定在450nm处的吸光度。若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl溶液或者1%w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。

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