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【动物实验外包服务】-大鼠雪旺细胞系RSC96条件培养液对少突胶质前体细胞的体外增殖作用

  目的:观察大鼠雪旺细胞系RSC96细胞条件培养基(RSC96-CM)对少突胶质祖细胞(OPC)增殖的影响并探讨其作用机制。

  方法:使用免疫粘附法从胚胎15天SD大鼠脊髓中分离OPC,使用BrdU摄取实验检测OPC增殖,使用RT-PCR检测RSC96细胞中的PDGF-检测AA和bFGF的表达。 ELISA技术检测RSC96-CM中PDGF-AA和bFGF蛋白浓度,并使用特异性抑制剂ERK和JNK观察PDGF-AA和bFGF对RSC96-CM诱导的OPC生长的影响,观察信号通路的作用。SC96-CM 在诱导某些抑制剂 OPC 生长中的作用。

  结果:与对照组相比,不同浓度RSC96-CM培养的OPCs的BrdU+细胞比例显着增加(Pu003c0.05)。其中,在含有 50?SC96-CM 的培养基中培养的 OPC 在 BrdU + 细胞比例显着增加时达到峰值。T-PCR证实RSC96细胞显着表达PDGF-AA和bFGF mRNA。作为ELISA的结果,发现RSC96-CM的PDGF-AA和bFGF的蛋白浓度为0.87,这是B104CM的PDGF-AA和bFGF的蛋白水平。上一份报告。次和 0.92 次。 PDGFRAG1295 特异性抑制剂和 bFGFRPD173074 特异性抑制剂均显着降低了SC96-CM 诱导的 OPC 增殖。此外,Erk 1/2 特异性抑制剂 U0126 和 JNK 特异性抑制 SP600125 的预孵育。SC96-CM 减少。得出的 BrdU + OPC 比值 (Pu003c0.01)。

  结论:RSC96-CM通过RSC96分泌的PDGF-AA和bFGF显着诱导OPC增殖并激活Erk 1/2和JNK信号通路。SC96-CM 也可用作 OPC 日常培养的扩增剂。

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