新浪微博
微信互动

四大酵母培养基的配置

一、目的要求
      了解合成培养基、半合成培养基和天然培养基的配制原理。  学习和掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的配制方法。
二、基本原理
      麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基。察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。麦芽汁培养基为天然培养基,马铃薯葡萄糖培养基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基,而察氏培养基则为合成培养基。培养基配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。
三、实验材料

      (一)  药品   葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4·7H2O,FeS04、琼脂。   

     (二)  仪器   天平、高压蒸汽灭菌锅。    

      (三)  玻璃器皿   移液管、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、培养皿、玻璃漏斗等。    

      (四)  其他物品   药匙、pH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。

四、实验内容
(一)  麦芽汁培养基的配制
1.培养基成分   新鲜麦芽汁一般为10-15波林。
2.配制方法

      (1)  用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡6-12h,置于15℃阴凉处发芽,上盖纱布,每日早、中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒的两倍时,让其停止发芽,晒干或烘干,研磨成麦芽粉,贮存备用。     

      (2)  取一份麦芽粉加四份水,在65℃水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化完全)。     

      (3)  糖化液用4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清,加水20 ml,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤)。     

      (4)  用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10-15波林,调pH至6.4。如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到10-15波林后使用。     

      (5)  如配固体麦芽汁培养基时,加入2%琼脂,加热融化,补充失水。     (6)  分装、加塞、包扎。     (7)  高压蒸汽灭菌  100 Pa灭菌20 min。

(二)  马铃薯葡萄糖培养基的配制

      1.培养基成分     马铃薯   20g     葡萄糖   2 g     琼脂    1.5-2g     水     100ml     自然pH  

      2.配制方法  (1)  配制20%马铃薯浸汁  取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000ml。80℃浸泡lh,用纱布过滤,然后补足失水至所需体积。100 Pa灭菌20 min。即成20%马铃薯浸汁,贮存备用。     (2)  配制时,按每100 ml马铃薯浸汁加入2g葡萄糖,加热煮沸后加入2g琼脂,继续加热融化并补足失水。     (3)  分装、加塞、包扎。     (4)  高压蒸汽灭菌  100 Pa灭菌20 min。

(三)豆芽汁葡萄糟培养基的配制
      1.培养基成分     黄豆芽   10g     葡萄糖   5g     琼脂    1.5-2g     水     100ml     自然pH    2.配制方法  (1)  称新鲜黄豆芽10g,置于烧杯中,再加入100 ml水,小火煮沸30 min,用纱布过滤,补足失水,即制成10%豆芽汁。     (2)  配制时,按每100 ml10%豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2 g琼脂,继续加热融化,补足失水。     (3)  分装、加塞、包扎。     (4)  高压蒸汽灭菌  100 Pa灭菌20 min。
(四)察氏(czapck)培养基的配制

      1.培养基成分     蔗糖       3g     NaN03     0.3g     K2HP04      0.1g     KCl        0.05g     MgSO4·7H2O     0.05 g     FeS04      0.001 g     琼脂      1.5-2g     蒸馏水     100ml     自然pH       

      2.配制方法  (1)  称量及溶化  量取所需水量约2/3左右加入到烧杯中,分别称取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培养基加入1ml 0.1%的FeS04溶液。     (2)  定容  候药品全部溶解后,将溶液倒入量筒中,加水至所需体积。     (3)  加琼脂  加入所需量琼脂,加热融化,补足失水。     (4)  分装、加塞、包扎。     (5)  高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。

五、实验报告内容

      记录你所配制培养基的名称及成分。

      (本文转载:丁香通

上一篇:双歧杆菌的分离、培养及鉴定
下一篇:四环素的定向发酵
分享到: