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实验动物免疫方案

    1、抗原: 蛋白质、多肽、细胞器、细胞、组织等。

 

    2、免疫方式:皮下注射、腹腔注射、静脉注射、肌肉注射等。

 

    3、不同动物免疫所需抗原量(以蛋白免疫为例

  >18-20kDa <18-20kDa
动物 抗原量 最佳抗原量 抗原量 最佳抗原量
兔子 20-200 100 50-400 200
小鼠 2- 40 15 4- 60 40
大鼠 10-50 30 20-150 50
绵羊 100-1000 200 200-1000 400
母鸡 20-200 100 50-400 200
单位微克

 

       4、免疫方案(以免疫兔子为例) :

天数 0 14 28 38 56 66 87
注射 x x x   x    
采血 2ml     2ml   2+20ml 2+50-70ml

 


 

       5、注意:

       第一次免疫用完全佐剂与免疫原混合,以后加强免疫用不完全佐剂与免疫原 混合,采取多点,时间间隔式免疫法。

 

       如果用细胞免疫兔子,那么每次免疫所需细胞量为 2-3 x 107cells。  在连续免疫完三次后,需要少量取血进行ELISA检测,检测所免疫动物的抗 体滴度,一般滴度能达到 1:10,000-50,000。在处死所免疫的动物前一周应加 强一次免疫。

 

       如果用小鼠免疫,可以尾静脉小量采血(大约 50µ l) ,最后取眼球大量采血 (大约 500-1000µ l) ;如果用兔子免疫,可以耳缘静脉小量取血(大约 2mL),  最后心脏大量取血(50-100mL)。

   

       按血清制备的标准方法将血清分离,并且分装成小份,储藏在- 80oC。  

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