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常用的实施实验动物安乐死的方法

  动物实验结束后,为了减轻动物的疼痛及痛苦,此时从人道主义的观点出发可以对这些动物实施安乐死(Euthanasia)。实施安乐死时有一些特殊的要求需要考虑,最重要的是安乐死的方法必须人道。动物实验中,有时为了获得动物组织器官进行研究,需要处死动物,安乐死的方法应该对动物的组织器官的研究没有影响。另外,实施安乐死的方法还要可靠、有效、经济、容易实施,对实验人员必须安全。

  常用的实施安乐死的方法可分为两大类:药物化学法和机械物理法

  1.化学药物法

  是指用一种药物或其他化合物处死动物。最常用的是使用过量的全身麻醉剂,使动物心跳停止、呼吸衰竭而死亡。戊巴比妥相对来说作用迅速、给药简单、价格低廉,是常用的实施安乐死选择的药物,腹腔或静脉注射过量的戊巴比妥(100~150mg/kg)即可。巴比妥酸盐可致血管扩张,引起器官淤血,可能影响组织学研究。

  用于安乐死的吸入麻醉剂有乙醚、氟烷、恩氟烷和异氟烷等。CO2也常被用做安乐死的吸入剂。将动物放置含有100%CO2的环境中,很多种动物就产生严重的呼吸困难而死亡。用这种方法处死动物时,动物意识清醒,能感受到痛苦,不是理想的方法。如果将动物放置在一定湿度、C02和O2的比例为6:4的混合气体环境中,等动物逐渐丧失意识后,将CO2浓度升至100%,在最少保持10min以确定动物死亡,这时,动物完全是在无意识状态下死亡的,死亡需30~60min,如果时间太长,则不是首选的方法。CO2等吸入剂能诱发动物肺水肿,可能影响其后研究中对动物组织器官的利用。

  2.机械物理法

  大多数的药物化学法存在着潜在干扰某些实验结果的可能性,所以利用机械物理法实施安乐死可能更适合动物处死后利用某些特定的组织器官进行生物化学或组织学检查。如果有可能,在应用机械物理法处死动物时,应尽可能使用一些镇静剂或麻醉剂。所有的机械物理法都可能对动物造成痛苦。所以在挑选一种安乐死的方法时,应当考虑到这一点。机械物理法包括断头术(Decapitation)和颈椎脱臼术(Dislocation of cervical vertebra)。断头术和颈椎脱臼术适合于小鼠、大鼠、仓鼠、沙鼠、小狗、小猫和小鸟,并不适宜于大动物。如果机械物理法能被快速、专业地完成,就不会给动物带来疼痛。实施机械物理法后,应给动物放血或损毁大脑,确保动物死亡。

  对于新生的动物和体重小于20g的动物,可以把它们浸入液氮中迅速冷冻来实施安乐死。这种方法能否使动物快速丧失意识还受到一些人的质疑。另一种替代方法是对动物的中枢神经系统进行微波照射,使动物立刻死亡,动物的组织器官生化特性不发生改变。如果使用微波,必须有相应的设备。

  对于大型的实施动物,如体型较大的犬、猪、反刍动物、马等,可以先麻醉,使其丧失意识,然后切断其颈总动脉放血,使之立即死亡。

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