1. 组织切片用PBS浸润，复温20分钟。

2. 将切片移入湿盒中加入新鲜配制的3%双氧水,以去除内源性过氧化物酶封闭液，室温孵育10分钟，PBS充分淋洗；

3. 滴加正常山羊血清封闭液，室温30分钟，甩去多余液体；

4. 滴加一抗工作液，37℃孵育2h（或4℃过夜），然后PBS充分淋洗；

5. 滴加兔/鼠二抗工作液，室温孵育1h，PBS充分淋洗；

6. DAB显色5-10分钟，在显微镜下掌握染色程度 ；

7. PBS或自来水冲洗1分钟 ；

8. 苏木精复染3分钟，盐酸酒精分化,反蓝；

9. 自来水冲洗1分钟 脱水、透明、封片、镜检。